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冰凍切片軟骨組織阿爾新藍(alcian blue)染色試劑盒產品說明書

更新時間:2023-02-22 點擊次數:642

MB80015.2 v.A

 

 冰凍切片軟骨組織阿爾新藍(alcian blue)染色試劑盒產品說明書(中文版)

 

主要用途

 

 冰凍切片軟骨組織阿爾新藍(alcian blue)染色試劑是一種旨在使用陽離子染料阿爾新藍,使軟骨組織上蛋白多糖聚糖染色,呈現深藍色,來分析冰凍組織切片組織中軟骨生成狀況的而經典的技術方法。該技術經過精心改良、成功實驗證明的。主要適用于冰凍組織切片的細胞分化和軟骨生成的檢測。廣泛用于軟骨細胞或組織病理生理的研究。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,顯色清晰。

 

技術背景

 

間質干細胞(mesenchymal stem cell)分化產生脂肪細胞(adipocyte)、成骨細胞(osteoblast)、肌細胞(myocyte和軟骨細胞(chondrocyte)。軟骨細胞及其細胞外基質(extracellular matrix)構成軟骨組織(cartilage tissue),其含有硫酸軟骨素(chondroitin sulfate)和硫酸角質素(karatan sulfate)等為主要成分的蛋白多糖(proteoglycan)聚糖(aggrecan),成為軟骨生成(chondrogenesis)的標記(indicator)。阿爾新藍(alcian blue)是一種陽離子含銅染料,使酸性粘多糖(mucopolysaccharide類蛋白聚糖染色,呈現深藍色。

 

產品內容

 

 清理液(Reagent A            毫升

 固著液(Reagent B            毫升

 染色液(Reagent C            毫升

 去色液(Reagent D            毫升

產品說明書               1

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里; 染色液(Reagent C),避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安全。有效保證3

 

用戶自備

 

小型染色缸:用于石蠟切片的蠟操作

光學顯微鏡:用于組織細胞染色后觀察分析

 

實驗步驟

 

一、 固著處理

1. 

2. 取出10片待測的冰凍組織切片

3. 小心加上xx微升 清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

4. 室溫下孵育5分鐘

5. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

6. 小心加上xx微升 固著液(Reagent B,鋪滿整個樣品表面

7. 室溫下,孵育60分鐘

8. 小心移去載玻片上的 固著液(Reagent B

9. 小心加上xx微升 清理液(Reagent A),清洗樣品表面

10. 小心移去載玻片上的 清理液(Reagent A

11. 重復實驗步驟910一次

二、樣本染色處理

1. 小心加上xx微升 染色液(Reagent C,鋪滿整個片樣品表面

2. 室溫下孵育60分鐘,避免光照

3. 小心移去片上的 染色液(Reagent C

4. 小心加xx微升 清理液(Reagent A

5. 室溫下孵育2分鐘

6. 小心 清理液(Reagent A

 

三、 (選擇步驟)樣本復染處理

 

1. 小心加上xx微升 去色液(Reagent D),覆蓋整個片樣品表面

2. 室溫下孵育3分鐘(注意:觀察背景藍色變化,避免過度褪色)

3. 小心 去色液(Reagent D

4. 小心加xx微升 清理液(Reagent A

5. 室溫下孵育2分鐘

6. 小心移去 清理液(Reagent A

7. (選擇步驟)樣本復染處理(核固紅)

8. (選擇步驟)樣本透明處理和封片

9. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:性細胞呈現深藍,背景呈現淺藍色調(如果復染:細胞質呈現粉紅色,細胞核呈現紅色)

注意事項

1. 本產品為50次操作

2. 操作時,須帶手套

3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全

4. 所有操作在室溫下進行

5. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面

6. 樣品色避免過度

7. 建議使用 核固紅復染試劑盒(  40011),增強染色對比度

8. 組織細胞染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察 

9. 本公司提供系列軟骨組織細胞染色試劑產品

 

質量標準

 

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定顯色清晰

 

 

 


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