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關于ATCC細胞,你了解多少?

更新時間:2023-01-11 點擊次數:766
  ATCC以生命科學領域知識的獲取,分類,匯總,完善進而廣泛傳播為己任,以期為推動生物原料,生物信息,生物技術,知識產權,規范等相關領域的前沿性、合法化、實用性發揮一定的作用。
  ATCC擁有目前較大的、品種較豐富的微生物、細胞系以及重組DNA原料,同時它也是科研工作者的提供可靠的研究材料的供應商。
  ATCC的成立可追溯到1925年,一個科學委員會認識到科學研究對于微生物的大量需求而萌發了創建一個微生物相關制品供應中心的想法。
  而今,ATCC已經發展成了一個性非營利性的生物資源中心,向遍布的企業、政府以及科研機構提供生物制品、技術支持和培訓教程。
  細胞模型是促進我們對細胞生物學、分子信號通路的認識、以及發現新的治療方法的一個重要工具。對基因異常引起疾病的病因學研究,以及對潛在治療方法的評估,通常都是通過相關的體外模型來完成的。
  ATCC細胞復蘇程序:
  1、準備細胞培養容器(如T-75細胞瓶),加入至少10 ml適當的培養基,并平衡溫度及pH。
  2、從液氮罐中取出凍存管,并在37℃(或適合該細胞的溫度)水浴中緩慢搖動至冰晶*融化(約2 min),注意解凍過程要迅速。
  3、從水浴中取出凍存管,浸泡或者噴撒酒精消毒。后續的操作,需在無菌操作臺中,并保證嚴格無菌。
  4、擰開凍存管蓋,將細胞懸液轉移至含有9ml*培養基的無菌離心管中。溫和離心(125g×10min),棄去上清去除凍存保護劑。注意不要擾動細胞層。加入1-2 ml*培養基重懸細胞,緩慢吹打使細胞團變松散。將細胞懸液轉移至含培養基的容器中充分混合。
  5、24小時后,檢測細胞狀態。
  注:細胞復蘇時,應以zui快速度融化凍存的細胞溶液,然后迅速與*培養基混合,并接種到合適的細胞瓶中。
  單層貼壁細胞:
  為了保證單層貼壁細胞的對數生長,需要定期傳代。當細胞生長接近指數生長后期(匯合率大約70%到90%),準備傳代。針對傳代過程,ATCC提供的產品說明中,會推薦細胞傳代分配比例和補充培養基策略。
  單層貼壁細胞傳代,需要打斷細胞之間的連接。對于比較松散的連接,猛擊培養瓶側壁,可以分離細胞。很多情況下,需要胰蛋白酶/EDTA的蛋白水解酶來消化。對于一些細胞系,需要采用刮等機械方法分離細胞。細胞分離成為單細胞懸液后,稀釋到適當的密度并轉移到新的培養瓶中,在適當的生長培養基中,細胞將再貼壁生長和分裂。
  由于每種細胞都是*的,孵化時間和溫度、清洗次數或溶液配方可能會有所不同。分離過程中,應用顯微鏡密切觀察細胞,以防止細胞損傷。這個過程根據容器使用合適的培養體積。

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